散文精选网琼脂糖凝胶电泳
虽然已经普及了很多次关于电泳的问题，但是还是有不少小伙伴留言了一些问题，今天小编汇总了一些适用于琼脂糖凝胶 的改良方法，一起来看看吧～
对于E-Gel?琼脂糖凝胶
电泳时间可以比建议时间更长吗？
对于单排胶孔凝胶，电泳时间不要超过60分钟，对于双排胶孔凝胶，电泳时间不要超过25分钟。电泳时间过长离子将被耗尽，凝胶将被损坏。对于E-Gel? 48琼脂糖凝胶，电泳时间不要超过30分钟，对于E-Gel? 96琼脂糖凝胶，电泳时间不要超过20分钟。
一个单一载体在电泳结束后
琼脂糖凝胶上出现多条DNA条带
这是为什么？
DNA质粒的构象会影响它在凝胶内的迁移。质粒DNA可以是超螺旋的（天然3D构象），有切口环状的（一条链上有切口），或者线性的（两条链都有切口）。
你可能在琼脂糖凝胶上看到所有这三种形式。其中超螺旋DNA迁移最快，在凝胶中的位置最靠下；线性DNA条带在凝胶中位于中间位置，而带有切口的DNA通常出现在凝胶最顶部，因为它迁移最慢。
我不小心将 E-Gel?琼脂糖凝胶
保存在了4°C而不是室温
我还能使用它们吗？
虽然我们建议将它们保存在室温，但这些凝胶仍然可以使用。在电泳前将这些凝胶平衡至室温以获得最佳效果。
我的E-Gel?琼脂糖凝胶
在电泳时出现不均一现象，
条带分辨率低或者有拖尾现象。
怎么才能解决这一问题？
可能的原因有：
上样了太多的DNA。我们建议每孔上样20–100 ng DNA；但是，你可以每孔上样最多500 ng。
使用了高盐浓度的样本。样本中离子浓度>50 mM NaCl,100 mM KCl, 10 mM醋酸离子，或100 mM EDTA时，将降低分辨率。
样本可能使用了TAE稀释，而不是使用了TE或者水。
电泳时间过长。我们建议电泳25-30分钟以获得平直的条带。不要电泳超过60分钟，否则凝胶将被损坏。
使用了过高电压或过强电流。如果使用带电源的E-Gel?基座，电泳时应使用60–70 V (恒定电压) or 40–50 mA (恒定电流)。电流不能超过60 mA。
在E-Base?仪器上电泳E-Gel? 96琼脂糖凝胶时，确保您使用的是“EG”程序而非“EP”程序，“EP”程序是用于E-PAGE?凝胶的。
样本上样不正确或样本上样量太低。
凝胶没有在上样后立即电泳（为获得最好结果，请在上样后15分钟内开始电泳）。
我在进行E-Gel?琼脂糖凝胶电泳时
样本从孔内渗出。
这是什么原因造成的？
请确保您没有过量上样并且在移除梳子时胶孔没有被损坏。
我的E-Gel? iBase?/PowerBase?
/E-Base?系统持续发出蜂鸣声
或持续亮红灯。
我做错什么了吗？
请检查 E-Gel?胶盒和铜电极。你可以换一个新的胶盒看看是否接触不良。过冷的胶盒或不恰当的操作条件也可能造成这个问题。胶盒应在室温使用，避免将其保存在4°C。
我的 E-Gel?琼脂糖凝胶
在成像仪内观察时出现斑块。
我应该怎么办？
这里是一些建议：
用酒精和Kimwipes?纸巾擦拭胶盒。
对相机镜头进行清洁。
对成像系统的曝光时间和亮度选项进行调整。
和iBase?电源系统配套使用的
E-Gel? Safe Imager?实时透射仪
不工作了。
我应该怎么办？
请检查iBase?电源系统的电源线。PowerBase? v.4系统和E-Gel? Safe Imager?实时透射仪的电源线经常被混淆。
如果用错电源线，虽然风扇和LED灯将正常工作，但蓝光灯将不会工作。你需要使用iBase?电源线，它上面写有“48V”。
我在进行E-Gel? EX
琼脂糖凝胶电泳时没有电流
这是为什么？
这里是胶跑得不正常的一些常见原因：
底座的铜电极因为不当使用而损坏。请确保底座的铜电极是完好的。
您使用的胶盒已经过期或有瑕疵。
E-Gel? EX胶盒没有正确的插入底座。
您使用了错误的适配器。
我使用E-Gel? EX琼脂糖凝胶电泳时
分辨率低或者有拖尾现象。
这是为什么？
这里是一些可能的原因以及解决问题的建议：
过量上样。请不要上样超过建议的量。
高盐浓度。请稀释样本。
对E-Gel? EX琼脂糖凝胶进行了预电泳，这类凝胶是不建议进行预电泳的。
上样体积过小或者上样方法不正确。
上样时可能引入了气泡。气泡会导致条带弯曲。请根据凝胶种类和上样方法加入推荐体积的样本。为获得合适的条带分离效果，我们建议保持上样量一致。向所有空孔内加入去离子水或TE，并且避免引入气泡。
没有在上样后立即进行电泳。请在上样后一分钟内开始电泳。
E-Gel?琼脂糖凝胶可能过期了。请检查产品效期。
电泳时间过长或电流过高。较长的电泳时间会引起电流的上升，导致条带迁移较差或者凝胶融化。对于每种凝胶类型，电泳不要超过建议的时间。
#你问我答#想必以上的内容已经解决了各位一定的疑问，但实验中总有各种新的问题，不如将如果你的疑问留言给我们，待众高手的力量一起解决！
被采纳的留言会收到我们送出的惊喜好礼哦
封面图及部分文字图片来自：视觉中国。
如因版权等有疑问，请与本文刊发30日内联系本账号。
